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看看人家是如何用一个简单的实验发SCI的

一. 基本研究背景

先区分下Southern blotting(针对DNA检测的), Northern blotting (针对RNA检测的), 以及Western blotting (针对蛋白质检测的)。这些不同“方位”的检测在细胞生物学领域都有应用，其中Western blotting (WB) 是使用最为广泛的一种blotting，是检测和鉴定蛋白质的最常用方法。其过程如下：

Wester blotting 的过程

------Roy, Jyoti, et al. "Small RNA proteome as disease biomarker: An incognito treasure of clinical utility." AGO-Driven Non-Coding RNAs. Academic Press, 2019. 101-136.

二. 最新研究论文

近日，美国的研究人员在《BioTechniques》杂志上发表了题为“Optimization of western blotting for the detection of proteins of different molecular weight”的文章，对WB方法进行了优化，目的是“提高检测灵敏度，同时兼顾高分子量和低分子量蛋白的检测”。

------Heda, Ghanshyam D., et al. "Optimization of western blotting for the detection of proteins of different molecular weight." BioTechniques 0 (2020).

研究人员关注三个变量，转印膜的类型、封闭液的类型以及Towbin转移缓冲液（TTB）中的甲醇浓度。最终，作者认为，在WB中使用NC膜和封闭混合物，能够获得很强的特异性信号。转印缓冲液中甲醇的存在似乎对高分子量蛋白几乎没影响。对于中小分子量的蛋白，较低浓度的甲醇（10%）足以产生几乎最强的信号。因此，人们可以减少甲醇这种有毒溶剂的用量，而不会影响特异性的信号。

三. 文章思路和写作

WB作为一种几乎所有生化实验室都在使用的一种蛋白质检测手段，其实验过程竟然被研究，还发表了IF2.0左右的文章，有点不可思议吧？实验室还有许多这样的基础生化实验，如ELISA，纸层析，柱层析，DNA（plasmid or genomic; plant or tissue; blood or stool）提取，巨大核酸电泳，双向电泳，银染，ChIP，等等。我们能否根据实验室所长和个人需要，也发表一篇分析生物化学方面的SCI文章呢？我们以这篇为例，讨论如何做这方面的研究吧。

这篇研究WB的论文设计三个变量，包括转印膜的类型（PVDF， NC）、封闭液的类型（BSA，FBS，Gelatin, Bloto, mixture）以及Towbin转移缓冲液（TTB）中的甲醇浓度 (0, 10%, 20%)。根据蛋白分子量分为两种，高分子量和低分子量蛋白。作者首先考量的是转印膜的类型，固定甲醇浓度20%，封闭液的类型（BSA，FBS，Gelatin, Bloto, mixture）都测试高分子量的WB。很明显，在各种封闭液下，NC要优越些。从而确定了转印膜。其次，固定优化的转印膜（NC），比较封闭液（Bloto VS mixture）, 甲醇浓度 (0, 10%, 20%)都测试一遍。很明显，在封闭液mixture下, 蛋白条带（高分子量）更好。作者又使用另外一个蛋白（也是高分子量）测试了下，还是发现蛋白条带在封闭液mixture下表现更好。最后，作者使用了第三个蛋白--低分子量蛋白，进行WB测试，发现蛋白条带在封闭液mixture下表现更好，并且甲醇浓度10% VS 20% 没有引起显著差异。自然而然地，作者得出结论，NC更好，封闭液mixture更好，甲醇浓度10%就OK了。

这个分析生物化学实验的研究对象也不是多新颖，实验设计也不见得多巧妙（4个图而已），但是贵在扎实且实用，发个IF2.0左右的文章似乎也恰如其分。基础生化实验那么多，小伙伴们，我们也发一筐？小编就知道不少分析生物化学方面的SCI杂志（IF2-4），有需要的就请留言吧。